mRNA 存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器中，携带遗传信息，在蛋白质合成时充当模板的RNA。信使RNA从脱氧核糖核酸（DNA）转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸（RNA）。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板，决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA的表达对于生物体内的生命活动有着极为重要的作用，因此对mRNA的表达检测是在许多研究中必要的。实时定量PCR由于其灵敏度高、方便，快速等特点，成为检测mRNA表达情况的一个常用技术。
长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA，其本身并不编码蛋白或少编码蛋白质，但能够通过参与细胞内多种过程调控，在表观遗传调控、细胞周期调控和细胞分化调控等众多生命活动中发挥重要作用，成为继miRNA之后的新研究热点。
服务项目
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mRNA |
实时定量PCR表达检测 |
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lncRNA |
实时定量PCR表达检测 |
运用成熟的实时定量检测技术，结合目标mRNA/ lncRNA的特点设计特异性引物，保证扩增的特异性和准确性，提供稳定的检测结果。
技术路线
mRNA表达量检测
技术特点：
真核生物的mRNA逆转录可以采取使用Oligo（dT）为引物的方法，原核生物的mRNA逆转录可使用随机引物。在真核生物RNA质量不佳时，可同时使用Oligo（dT）和随机引物进行反转录。后根据序列特点直接设计相应的通用引物和特异性TaqMan探针即可。
IncRNA表达量检测
技术特点：
lncRNA与mRNA不同，可能具备polyA尾巴也可能不具有，因此在逆转录lncRNA的时候，统一使用随机引物进行扩增。后根据序列特点直接设计相应的通用引物和特异性TaqMan探针即可。除常规TaqMan探针以外，用户还可选择设计合成TaqMan-MGB探针，其探针设计得更短，可使得探针设计的成功率大为提高。
目的lncRNA的熔解曲线图 （仪器为Thermo Fisher Q6）
收样要求
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组织 |
>300mg 新鲜动植物样本，≥100mg叶片样本等 |
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细胞 |
>106个悬浮/贴壁细胞 |
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血液 |
>1ml全血/全血分离的有核细胞 |
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RNA |
针对mRNA：总RNA >1μg，体积>20μl，浓度> 50 ng/μl 针对lncRNA：总RNA>4μg，体积≥20μl，浓度≥200 ng/μl |
您可以得到的数据分析
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mRNA荧光定量 |
引物（或探针）及序列，扩增曲线，熔解曲线(SYBR Green方法)、数据分析结果报告。 |
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lncRNA荧光定量 |
引物（或探针）及序列，扩增曲线，熔解曲线(SYBR Green方法)、数据分析结果报告。 |
